eha105农杆菌感受态细胞
eha105 chemically competent cell
产品编码：                       保存条件： -80℃   
产品规格:
eha105 20×100μl
pcambia2301（control vector） 10ng/ul     10ul
               
eha105农杆菌感受态细胞基因型：
c58 (rif r) ti peha105 (ptibo542dt-dna) (strepr) succinamopine
eha105农杆菌感受态细胞简要说明：
eha105菌株由eha105菌株改造而来，为c58型背景，核基因中含有筛选标签——利福平抗性基因rif，为了便于转化操作，此菌株携带一无自身转运功能的琥珀碱型ti质粒peha105 (ptibo542dt-dna) ，此质粒含有vir基因（vir基因是t-dna插入植物基因组必需的元件，peha105 (ptibo542dt-dna)质粒自身的t-dna转移功能被破坏，但可以帮助转入的双元载体t-dna顺利转移）。
peha105 (ptibo542dt-dna)型ti质粒含有筛选标签：strep，赋予eha105菌株链霉素抗性，适用于水稻、烟草等植物的转基因操作，经pcambia2301质粒检测转化效率可达104cfu/μg。
eha105农杆菌感受态细胞操作说明：
取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上待其部分融化，处于冰水混合状态时插入冰中。 每100μl感受态加1ug（体积不大于10ul）质粒dna，用手管底混匀，依次于冰上静置5分钟、液氮5分钟、28℃水浴5分钟、冰浴5分钟。 加入700μl无抗生素的lb或yeb液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时。4. 6000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的lb或yeb平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天（当平板只含有50ug/ml kan 时，28℃培养48h即可；平板中同时加入50ug/ml kan，20ug/ml rif 时，需28℃培养60h；如果使用的平板含有50ug/ml rif 则需要28℃培养72-90h）。上海淳麦生物科技有限公司  感受态细胞培养专家  4006815880

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